Після використання перекису водню (особливо пароподібного перекису водню VHP) для дезінфекції та стерилізації в камерах біозахисту ретельний науковий моніторинг і перевірка результатів є єдиним способом підтвердити ефективність стерилізації, а також основні вимоги щодо контролю якості та дотримання нормативних вимог. Це не просто процес «запуску пристрою», а замкнутий -процес, який потребує багатьох фізичних, хімічних і біологічних доказів.
Далі наведено систематичний аналіз методів моніторингу та перевірки.
Основний принцип: система потрійної перевірки
Повна валідація повинна включати «моніторинг параметрів процесу», «хімічні індикатори» та «випробовування біологічних індикаторів», які доповнюють один одного та є незамінними.
Моніторинг параметрів процесу (-моніторинг у реальному часі для забезпечення відповідності умов стандартам)
Це перша лінія захисту для перевірки, яка включає-реєстрацію ключових фізичних і хімічних параметрів у режимі реального часу за допомогою датчиків пристрою, що доводить, що цикл стерилізації працює в межах установленого та ефективного діапазону параметрів.
Параметри моніторингу:
Концентрація парів перекису водню (ppm): найбільш критичний параметр. Вона повинна бути досягнута та підтримувана на заданій цільовій концентрації (наприклад, сотні ppm) протягом достатнього періоду часу. Низька концентрація може призвести до збою стерилізації.
Відносна вологість (% RH): контролюється на низькому рівні (зазвичай<40%) to ensure that VHP is in an efficient "micro condensation" state rather than large droplet condensation. Excessive humidity can dilute disinfectants and may damage equipment.
Температура: стежте за температурою камери, яка впливає на тиск насиченої пари та процес конденсації.
Тиск/потік повітря: переконайтеся, що камера герметична, а циркуляція газу нормальна.
Тривалість впливу: Тривалість підтримки цільової концентрації.
Як виконати:
Автоматично комплектується датчиками і системою управління, вбудованими в генератор VHP.
Ключова вимога: обладнання повинно мати можливість генерувати та зберігати повні циклічні графіки даних (крива концентрації в часі, крива температури та вологості), які мають бути включені як частина звіту про перевірку. Будь-яке відхилення параметра від попередньо встановленого діапазону повинно призвести до аварійного сигналу або завершення циклу.
Хімічні індикатори (якісні/напівкількісні, візуальні результати-в реальному часі)
Використовується для швидкого та інтуїтивно зрозумілого визначення, чи піддається предмет стерилізації перекисом водню, і може опосередковано відображати, чи достатня доза.
Тип і принцип:
Картка хімічного індикатора типу етикетки: містить барвники, чутливі до перекису водню. Коли накопичується достатня кількість дози перекису водню (концентрація x час), відбуваються незворотні зміни від одного кольору до іншого.
Місце розміщення: його слід розмістити у найбільш важкодоступному місці стерилізації, наприклад:
Найглибший куточок безпечного робочого простору шафи.
Всередині дренажного каналу.
Стик між фільтром і монтажною рамою (якщо це можливо).
Внутрішня витяжна труба (якщо покрита дезінфекцією).
Функції та обмеження:
Функція: забезпечує негайні результати для швидкого вивільнення; Переконайтеся, що пара поширюється в призначене місце; Як ідентифікатор для розрізнення «оброблених» і «необроблених» предметів.
Обмеження: можна лише підтвердити експозицію, неможливо підтвердити стерильність. Зміна кольору лише вказує на те, що було досягнуто мінімального порогу дози, але не гарантує знищення всіх мікроорганізмів.
Пробний тест біологічного індикатора (кількісний, остаточний доказ ефективності)
Це золотий стандарт перевірки та вирішальних доказів. Використовуючи стандартизовані мікробні спори з відомою високою стійкістю, прямо доведено, що процесу стерилізації достатньо для знищення мікроорганізмів, які важко вбити.
Вибір біологічних індикаторів:
Стандартний штам: Спори Geobacillus stearothermophilus. Це міжнародно визнана стандартна тест-бактерія з найсильнішою стійкістю до перекису водню.
Форма носія: зазвичай суспензія спор, забарвлена паперова смужка, лист з нержавіючої сталі або встановлений на спеціальному носії.
Відома кількість спор: кожен біологічний індикатор містить відому кількість спор, як правило, від 10 ^ 5 до 10 ^ 6 КУО (колонієутворюючі одиниці).
Стратегія розміщення (найважливіший крок):
Розташування: його слід розмістити в «найхолоднішій точці», де стерилізація є найбільш складною або куди найважче проникнути газу. Рекомендовані місця для шаф біозахисту включають:
Під верстаком, в кутку біля передньої решітки.
Стик між задньою стінкою і верстаком.
На звороті або в щілинах внутрішніх інструментів, таких як тримачі піпеток.
Якщо обсяг перевірки включає внутрішню частину випускного клапана або трубопроводу.
Кількість: використовуйте принаймні 3 біологічні індикатори та додайте один необроблений позитивний контроль.
Процес тестування та інтерпретації:
Експозиція: виконайте повний цикл стерилізації VHP за допомогою камери BI.
Переробка та вирощування:
Після завершення циклу видаліть БІ в стерильних умовах.
Помістіть його в спеціальну пробірку для відновлення, що містить культуральне середовище.
Культивуйте в інкубаторі при температурі 56-60 градусів протягом 24-48 годин (конкретний час згідно з інструкцією).
Одночасно культивуйте позитивний контроль (нестерилізований) і негативний контроль (стерильне культуральне середовище).
Інтерпретація результату:
Перевірка успішна: усі стерилізовані культуральні середовища BI залишаються прозорими (без зміни кольору/каламутності), що вказує на відсутність виживання спор. Позитивний контроль повинен демонструвати активний ріст (пожовтіння/каламутність культурального середовища), а негативний контроль повинен залишатися прозорим.
Помилка перевірки: будь-який оброблений BI, що демонструє ріст (пожовтіння/каламутність), свідчить про збій циклу стерилізації. Необхідно ретельно дослідити причини (такі як помилки параметрів, розміщення, несправності обладнання, проблеми з герметизацією тощо), відкоригувати план і знову провести повну перевірку.
Цикл і тип перевірки
Перша перевірка:
Після встановлення обладнання VHP або первинної стерилізації нового типу безпечної шафи її необхідно провести.
Це найповніша перевірка, яка вимагає визначення «найхолоднішої точки» та встановлення ефективних параметрів контуру.
Регулярна ревалідація:
Зазвичай проводиться кожні шість місяців або щорічно.
Використовується для підтвердження узгодженості обладнання, програм і операторів.
Щоденний моніторинг:
Для кожного циклу стерилізації слід використовувати хімічні індикатори, а також переглядати карти параметрів процесу.
Частоту тестування біологічних індикаторів можна зменшити відповідно (наприклад, щомісяця або щокварталу), але в областях із суворими правилами може знадобитися використання кожної партії/циклу.
Записи документів і звіти (докази відповідності)
Усі дії з моніторингу та верифікації мають бути офіційно задокументовані, а звіт повинен містити щонайменше:
Інформація про обладнання: модель і номер генератора VHP.
Інформація про цільовий пристрій: модель біозахисту, номер, розташування.
Параметри циклу: встановити цільову концентрацію, час, температуру та вологість тощо.
Графік даних процесу: крива концентрації та часу фактичної роботи тощо.
Хімічні показники: тип, номер партії, місце розміщення, результати зміни кольору (фото додаються).
Біологічні показники: штам, номер партії, кількість спор, місце розміщення, результати посіву (додаються фото пробірки з культурою).
Висновок: чітко визначте, чи ефективний цикл стерилізації.
Виконавець і Дата: Підпис оператора та рецензента.
резюме
Стерилізація без стерилізації еквівалентна відсутності стерилізації.
Надійною системою валідації для дезінфекції перекисом водню та стерилізації біозахистних шаф є:
Забезпечте контроль процесу за допомогою «відображення параметрів процесу», досягніть швидкого візуального вивільнення за допомогою «хімічних індикаторів» і зрештою отримайте сертифікат максимальної мікробіологічної ефективності за допомогою «провокаційного тестування біологічних індикаторів».
Ця система потрійної перевірки є ключем до підвищення рівня дезінфекції перекисом водню з «операції» до відстежуваної, відтворюваної та надійної «науки», а також є наріжним каменем відповідності вимогам GLP, GMP та акредитації лабораторій біобезпеки в країні та за кордоном. Керівники лабораторій повинні впроваджувати це як обов’язкову процедуру та постійно контролювати це.
